Sistema de inmunoensayo de quimioluminiscencia
¿Por qué elegir REALMENTE?
Equipo profesional
REALY cuenta con un departamento de desarrollo dedicado al desarrollo de reactivos IVD. Nuestro personal técnico es responsable del desarrollo de procesos, la mejora de procesos y el desarrollo de formulaciones.
Seguro de calidad
Contamos con certificados CE, certificación del sistema de calidad ISO 13485, Licencia de Fabricación y Autorización de Comercialización en el país de origen. También estamos preparando la FDA y otros certificados.
Estricto control de calidad
Mantener un estricto control de calidad durante el proceso. La seguridad de nuestros productos se verifica mediante extensos procedimientos de prueba, muestreo y verificación para cumplir con las especificaciones del producto final.
Ventas al mundo
Participamos en exposiciones médicas en muchos países como Medlab, Medica y AACC cada año. La red comercial ha cubierto más de 80 países y regiones, distribuyendo productos de alta calidad a precios muy competitivos.
CLIA es una técnica para determinar concentraciones de muestras en función de la intensidad de la luz emitida por una reacción química y biológica. Los sistemas de quimioluminiscencia (CL) y las inmunorreacciones se combinan en CLIA. Se han utilizado algunos productos químicos como etiquetas CL y el sistema genera quimioluminiscencia cuando se agregan los sustratos CL, lo que permite medir las muestras. Los sustratos de CL más frecuentes incluyen luminol, sus derivados, fosfatasa alcalina (ALP), peroxidasa y compuestos de éster de acridinio. En CLIA, la enzima también se utiliza para marcar las proteínas diana. La ALP y la peroxidasa de rábano picante se utilizan ampliamente para el etiquetado de enzimas.
El inmunoensayo de quimioluminiscencia contiene dos sistemas: inmunoensayo y ensayo de quimioluminiscencia. El sistema de inmunoensayo utiliza sustancias quimioluminiscentes o enzimas como marcadores, que se marcan directamente en el antígeno o anticuerpo, y el complejo inmunológico antígeno-anticuerpo se forma mediante la reacción entre el antígeno y el anticuerpo. El sistema de análisis de quimioluminiscencia es un sustrato luminiscente al que se le añade un oxidante o una enzima después de la reacción inmune. Después de que el oxidante oxida la sustancia quimioluminiscente, se forma un intermedio en un estado excitado, que emite fotones para liberar energía y volver a un estado fundamental estable. La intensidad de la luminiscencia se puede detectar utilizando un instrumento de medición de señales de luminiscencia. Según la relación entre el marcador de quimioluminiscencia y la intensidad de luminiscencia, el contenido del analito se puede calcular utilizando la curva estándar.
Tres sistemas de etiquetas diferentes de CLIA
CLIA tiene tres sistemas de etiquetas diferentes según la diferencia del mecanismo físico-químico de la emisión de luz:
Etiquetar producto químico directamente involucrado en la reacción de emisión de luz
Este tipo de sustancia química con estructura especial puede transferirse a un estado excitado mediante una reacción química. Los fotones se liberarían cuando la sustancia química cayera al estado fundamental desde el estado excitado. El producto químico típico es el éster de acridinio y sus derivados. La exposición de una etiqueta de éster de acridinio a una solución alcalina de peróxido de hidrógeno desencadena un destello de luz. Un desarrollo posterior han sido los marcadores de éster de sulfonamida de acridinio. También es activado por peróxido de hidrógeno alcalino para emitir un destello de luz.
Reacción de emisión de luz catalizada por enzimas
Este tipo de quimioluminiscencia utiliza enzimas para marcar anticuerpos. Técnicamente hablando, es un inmunoensayo ligado a enzimas que utiliza una sustancia química luminiscente como sustrato en lugar de cromógeno. Las enzimas más utilizadas son la peroxidasa de rábano picante (HRP) y la fosfatasa alcalina (AP), cada una tiene sus propios sustratos luminiscentes. El luminol es un sustrato quimioluminiscente muy común utilizado para la detección de HRP. HRP cataliza la descomposición de luminol en presencia de peróxido para producir un intermedio en estado excitado. Se emiten destellos de luz visible (máximo a 425 nm) cuando se desintegra el intermedio singlete.
Reacción redox mediada por emisión de luz
Otro sistema CL es digno de mención porque el reactivo se regenera y, por tanto, se puede reciclar. Este sistema utiliza rutenio tris-bipiridina (bpy) como etiqueta, implica la reacción de Ru(bpy)33+ y Ru(bpy)3+ para producir un estado excitado de Ru(bpy)32+ , una especie estable que decae al estado fundamental emitiendo una emisión naranja de 620 nm. Ru(bpy)33+ y Ru(bpy)3+ se pueden electrogenerar a partir de Ru(bpy)32+ mediante reducción a aproximadamente -1.3 V y oxidación a aproximadamente { {10}}.3 V. Este sistema está dedicado a la electroquimioluminiscencia con sensibilidad y especificidad ultraaltas.
Ventajas del sistema de inmunoensayo de quimioluminiscencia
Alta sensibilidad
La sensibilidad es la clave para el rendimiento superior del analizador de inmunoensayo. La sensibilidad de algunos analizadores puede alcanzar 10 -16 mol/L (RIA para 10-12 mol/L). Otro ejemplo son los sustratos quimioluminiscentes (como AMPPD), la concentración de fosfatasa alcalina se puede detectar que el sustrato cromogénico es sensible 5 x 10 ^ 5 veces.
Amplio rango cinético lineal
La intensidad de luminiscencia del inmunoensayo de quimioluminiscencia es lineal entre 4 y 6 órdenes de magnitud con respecto a la concentración de la sustancia medida. Esta es una ventaja significativa en comparación con el rango de absorbancia (OD) de 2.0 para inmunoensayos enzimáticos colorimétricos.
Larga duración de la señal luminosa
El tipo luminoso CLIA produce una señal luminosa que dura horas o incluso un día. Esto ciertamente simplifica la operación y medición experimental.
El método de análisis es simple y rápido
La mayoría de los analizadores de inmunoensayo de quimioluminiscencia son de un solo paso y solo requieren la adición de un reactivo (o una combinación de reactivos).
Resultados estables, pequeño error
La muestra emite luz directamente por sí sola, sin irradiación de ninguna fuente de luz, eliminando el impacto de varios factores posibles (estabilidad de la fuente de luz, dispersión de la luz, selector de ondas de luz, etc.) en el análisis. Esto hace que los resultados del análisis sean sensibles, estables y fiables.
Buena seguridad y larga vida útil
El analizador de inmunoensayo quimioluminiscente elimina el uso de sustancias radiactivas. Hasta el momento no se ha demostrado que sea perjudicial. Además, los reactivos utilizados para el inmunoensayo son estables y pueden almacenarse hasta por un año.
- 96-placa de microtitulación de pocillos y selladores
- Diluyente de muestra
- Anticuerpos de captura y/o detección
- Conjugado avidina/HRP
- Tampón de lavado
- Solución de sustrato
- Protocolo detallado
Aplicaciones del sistema de inmunoensayo de quimioluminiscencia
Diagnóstico clínico:CLIA se utiliza ampliamente en laboratorios clínicos para diagnosticar diversas enfermedades y afecciones médicas. Puede medir biomarcadores, hormonas, anticuerpos y otros analitos indicativos de enfermedades específicas.
Endocrinología:Se usa comúnmente para evaluar la función tiroidea, los niveles de hormonas reproductivas y los niveles de hormonas suprarrenales, lo que ayuda en el diagnóstico y tratamiento de trastornos endocrinos.
Monitoreo Terapéutico de Medicamentos (TDM):CLIA se emplea en TDM para medir las concentraciones de fármacos en la sangre, asegurando que los medicamentos estén dentro del rango terapéutico óptimo.
Alergia e Inmunología:CLIA se utiliza para detectar anticuerpos IgE específicos de alérgenos en la sangre, lo que ayuda en el diagnóstico de alergias. También se utiliza para evaluar la respuesta inmune y los niveles de anticuerpos en diversos trastornos inmunológicos.
Pruebas de enfermedades infecciosas:CLIA se utiliza ampliamente para detectar agentes infecciosos, como virus, bacterias y parásitos, en muestras clínicas.
Pruebas de enfermedades autoinmunes:CLIA se utiliza para detectar autoanticuerpos asociados con enfermedades autoinmunes, como la artritis reumatoide, el lupus eritematoso sistémico y la esclerosis múltiple.
Biomarcadores de Oncología y Cáncer:CLIA se aplica en oncología para detectar marcadores tumorales y antígenos específicos del cáncer.
Salud reproductiva:CLIA se utiliza en salud reproductiva para medir hormonas relacionadas con la fertilidad y el embarazo.
Prueba de drogas:CLIA se emplea en programas de pruebas de drogas, detección de drogas en el lugar de trabajo y toxicología forense para detectar drogas de abuso o drogas terapéuticas en muestras biológicas, como orina y sangre.
Investigación médica:CLIA es una herramienta esencial en la investigación médica para cuantificar biomoléculas y estudiar mecanismos de enfermedades. Ayuda a comprender la progresión de la enfermedad, identificar nuevos biomarcadores y evaluar posibles intervenciones terapéuticas.
Procedimiento del sistema de inmunoensayo de quimioluminiscencia.
Definir el rango dinámico esperado
Es importante calcular el rango de concentración aproximado del analito en su muestra. Además, debe determinar cuál es el rango de concentración óptimo recomendado para detectar el analito deseado.
Definir la muestra ensayada
El tipo de muestra (p. ej., sangre, suero, orina, etc.) le ayudará a comprender el rango dinámico esperado del analito contenido en la muestra.
Seleccione los anticuerpos que se utilizarán en el ensayo
Querrá seleccionar anticuerpos que sean altamente específicos para su analito único. La especificidad es clave para el éxito de su ensayo.
Elige tus mejores cuentas magnéticas
Deberá determinar cuál debe ser el tamaño de perla, el área de superficie de la perla y el contenido de óxido de hierro óptimos para su ensayo de analito específico.
Optimice el procedimiento de recubrimiento
Al recubrir sus perlas, deberá tener en cuenta las propiedades de adsorción de las mismas, cualquier enlace covalente que necesite crear y los efectos biológicos de unir proteínas a sus perlas, o si necesitará proteínas bioactivadas.
Seleccione su método de homogeneización
Su elección de homogeneización dependerá del equipo que tenga, el personal que trabaja en el equipo, el tamaño de sus muestras y la facilidad de uso dentro del ensayo.
Seleccione la tecnología de separación biomagnética correcta
Esta tecnología ayuda a eliminar anticuerpos libres y otros contaminantes. Se prefieren los sistemas que pueden ayudarle a validar fácilmente su proceso y a ampliarlo.
Mejore sus inmunoensayos cuando sea necesario
Si puede mejorar su ensayo, es importante que lo haga. Hacer que su ensayo sea más eficiente, más preciso y más fácil de realizar es importante para los resultados finales de su análisis.
1.La unidad de concentración predeterminada de este ensayo es ng/mL o nmol/L.
Factor de conversión:
- o ng/mL x 2.5=nmol/L
- o nmol/L x 0.4= ng/mL
2.Debido a diferencias metodológicas o especificidad de anticuerpos, puede haber desviaciones entre los resultados de las pruebas de reactivos de diferentes fabricantes. Por lo tanto, no se deben realizar comparaciones directas para evitar interpretaciones erróneas.
3. Cuando la concentración de 25-OH VD en la muestra excede 100.00 ng/mL, se puede realizar una dilución de la muestra antes de la medición (se recomienda dilución 2-veces).
4.Cualquier resultado por debajo del límite mínimo de detección se informará como<3.00 ng/mL; any result above the maximum detection limit will be reported as >100.00 ng/mL.
Tomando precauciones
No utilice kits de reactivos más allá de la fecha de vencimiento.
No intercambie componentes de reactivos de diferentes reactivos o lotes.
Antes de cargar el kit de reactivos en el sistema por primera vez, es necesario mezclarlo para resuspender las microperlas magnéticas que se han asentado durante el envío. Para obtener instrucciones sobre la mezcla de microesferas magnéticas, consulte la sección Preparación del reactivo de este prospecto.
Para evitar la contaminación, use guantes limpios cuando opere con un kit de reactivos y una muestra.
Con el tiempo, los líquidos residuales pueden secarse en la superficie del tabique. Normalmente se trata de sales secas que no tienen ningún efecto sobre la eficacia del ensayo.
Para evitar la evaporación del líquido en los kits de reactivos abiertos en un refrigerador, se recomienda sellar los kits de reactivos abiertos con los sellos de reactivo contenidos en el paquete. Los sellos de reactivos son de "un solo uso" y si necesita más sellos, comuníquese con nosotros.
Nuestro certificado
Hemos pasado varios certificados como CE e ISO, y los productos que ofrecemos tienen garantía de calidad.
Problemas comunes del sistema de inmunoensayo de quimioluminiscencia
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